رنگ‌آمیزی گرم: تفاوت میان نسخه‌ها
محتوای حذف‌شده محتوای افزوده‌شده
بدون خلاصۀ ویرایش |
بدون خلاصۀ ویرایش |
||
خط ۱۲:
مهم‌ترین مرحله رنگ آمیزی است. دراین مرحله پس از شستشوی لام با آب٬ لام به مدت ۱۵ تا۲۰ ثانیه در معرض مواد'''رنگ زدا''' مانند '''الکل''' '''استون''' قرار می‌گیرد سپس با آب مورد شستشو قرار می‌گیرد. درباکتریهای گرم منفی که دارای لایه‌های [[پپتیدوگلیکان]] محدود وغشای خارجی غنی از چربی هستند این حلال باعث حذف این لایه‌ها وغشا می‌گردد وباکتری رنگ مراحل قبل راازدست می‌دهد. ولی درباکتریهای گرم مثبت به علت ضخامت زیاد لایهٔ پپتیدوگلیکانی وعدم وجود لیپید فراوان در غشا رنگ مرحله قبل ازغشا خارج نمی‌شود .درنتیجه پس ازاین مرحله باکتریهای گرم منفی بی رنگ ولی باکتریهای گرم مثبت کماکان بنفش باقی خواهند ماند .
* در انتها سطح فروتی رابا '''سافرانین'''(با [[فرمول شیمیایی|فرمول]]C<sub>20</sub>H<sub>19</sub>N<sub>4</sub>Cl) یا '''فوشین (قرمز رنگ)''' به مدت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه می‌پوشانیم سپس باآب شستشو داده و پس از خشک شدن بامیکروسکوپ مورد بررسی قرار می‌گیرد. دراین مرحله باکتریهای بی رنگ (باکتریهای گرم منفی) به رنگ قرمز یا صورتی درمی‌آیند وباکتری‌های بنفش یا آبی (باکتریهای گرم مثبت) بدون تغییر رنگ باقی می‌مانند .<ref>[http://www.chemspider.com/Chemical-Structure.2005991.html ChemSpider: chemical formule of Safranin]</ref>
== نکات مهم در رنگ امیزی گرم ==
1- حرارت بیش از اندازه هنگام تثبیت گسترش باعث پاره شدن دیواره سلولی باکتری شده . بنابراین باکتری گرم مثبت رنگ اولیه (کریستال ویوله) را هنگام رنگ بری از دست می دهد و رنگ ثانویه را جذب می نماید و در نتیجه باکتری گرم مثبت ، بصورت گرم منفی دیده می شود.
2- اگر گسترش ضخیم باشد هنگام مرحله بی رنگ شدن ، ممکن است مانند یم گسترش معمولی رنگ نشود و این مسئله باعث خطا در تشخیص شما در گرم منفی یا مثبت بودن باکتری خواهد شد.
== کاربرد رنگ آمیزی گرم ==
از رنگ‌آمیزی گرم به دو جهت استفاده می‌شود:
سطر ۵۰ ⟵ ۵۳:
== منابع ==
[http://persianlab.com/%D9%86%DA%A9%D8%A7%D8%AA-%D9%85%D9%87%D9%85-%D8%AF%D8%B1-%D8%B1%D9%86%DA%AF-%D8%A7%D9%85%DB%8C%D8%B2%DB%8C-%DA%AF%D8%B1%D9%85/ نکات مهم در رنگ امیزی گرم]
{{پانویس}}
* میکروبیولوژی عمومی؛ دکتر فریدون ملکزاده، انتشارات دانشگاه تهران.
* میکروبیولوژی جاوتس؛
{{چپ‌چین}}
* Haward Hughes Medical Institute- 1999 Holiday Lecture on science CD-ROM
| |||