رنگ‌آمیزی گرم: تفاوت میان نسخه‌ها

محتوای حذف‌شده محتوای افزوده‌شده
جز خنثی‌سازی ویرایش 21610770 توسط 188.214.71.19 (بحث)
خط ۱۰:
* پس از شستشوی فروتی با آب، رنگ کریستال ویوله را با افزودن لوگول (خنثی نمودن PH) به مدّت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه تثبیت می‌کنیم. لوگل با کریستال ویوله ترکیب شده و ایجاد کمپلکس‌هایی می‌کند که باعث تثبیت رنگ کریستال ویوله درداخل دیوارهٔ سلولی باکتری می‌شود. پس ازاین مرحله، همه باکتری‌ها هم‌چنان به رنگ بنفش مشاهده می‌شوند.
* مرحله رنگ زدایی:
این مهم‌ترین مرحلهٔ رنگ‌آمیزی است. دراین مرحله پس از شستشوی لام با آب، لام به مدت ۱۵ تا۲۰ ثانیه در معرض مواد'''رنگ زدا''' مانند '''[[الکل]]''' '''[[استون]]''' قرار می‌گیرد سپس با آب مورد شستشو قرار می‌گیرد. درباکتری‌های گرم منفی که دارای لایه‌های [[پپتیدوگلیکان]] محدود وغشای خارجی غنی از چربی هستند این حلال باعث حذف این لایه‌ها وغشا می‌گردد وباکتری رنگ مراحل قبل را از دست می‌دهد؛ ولی درباکتری‌های گرم مثبت به علت ضخامت زیاد لایهٔ پپتیدوگلیکانی وعدم وجود لیپید فراوان در غشا رنگ مرحلهٔ قبل ازغشا خارج نمی‌شود. درنتیجه پس ازاین مرحله باکتری‌های گرم منفی بی‌رنگبی رنگ ولی باکتری‌های گرم مثبت همچنان بنفش باقی خواهند ماند.
* در انتها سطح فروتی را با '''[[سافرانین]]''' (با [[فرمول شیمیایی|فرمول]]C<sub>20</sub>H<sub>19</sub>N<sub>4</sub>Cl) یا '''فوشین (قرمز رنگ)''' به مدت ۳۰ تا ۴۵ ثانیه پوشانده و سپس باآب شستشو داده و پس از خشک شدن با [[میکروسکوپ]] مورد بررسی قرار می‌گیرد. دراین مرحله باکتری‌های بی‌رنگ (باکتری‌های گرم منفی) به رنگ قرمز یا صورتی در می‌آیند وباکتری‌های بنفش یا آبی (باکتری‌های گرم مثبت) بدون تغییر رنگ باقی می‌مانند.<ref>[http://www.chemspider.com/Chemical-Structure.2005991.html ChemSpider: chemical formule of Safranin]</ref>