فاژ فی‌سی۳۱: تفاوت میان نسخه‌ها

'''فاژ φC31'''، باکتریوفاژ ویژهٔ [[باکتری]]‌های جنس [[استرپتومایسس]] موجود در خاک می‌باشد. [[آنزیم]] [[اینتگراز]] این فاژ از آن میان ابزارهای پسندیده جهت پیوست [[ژن نوترکیب]] به [[ژنوم]] [[سلول]] میزبان در فرآیندهای [[مهندسی ژنتیک]] محسوب می‌گردد. این آنزیم از آن میان Recombinase‌های[[ریکامبیناز]]‌های درای [[اسید آمینه]] [[سرین]] در جایگاه فعّال، محسوب می‌شود. دیگر آنزیم‌های این خانواده دربرگیرنده γδ و Tn3 resolvase[[رزولواز]] باکتری [[اشرشیا کلای]] و اینتگراز سنتز شده بدست فاژ باکتری‌های [[گرم مثبت]] می‌باشد. Recombinase‌هایریکامبیناز‌های سرینی در سنجش با Recombinase‌های[[ریکامبیناز]]‌های واجد [[تیروزین]] مکانیسم عمل کاملاً متفاوتی دارند. هر دو دستهٔ این Recombinase‌هایریکامبینازهای جایگاه ویژه درون ارگانیسم‌های تک سلولی سنتز می‌گردند. علی رغم تفاوت‌های مشخص بیوشیمیایی و تکاملی این دو خانواده از Recombinase‌ها،ریکامبیناز‌ها، هردو گروه فرآیند پیوست ژنی را در درازای توالی‌های معیّن و بیشتر به درازای ۳۰ جفت باز انجام می‌دهند. site- specific بودن این دسته از آنزیم‌ها بی همتا بودن فرآیند پیوست ژنی در ژنوم‌های کوچک میکروبی و همچنین سلولهای پستانداران - علی رغم کاهش چشمگیر جایگاه مورد شناسایی آنزیم- را تضمین می‌کند. به گونه طبیعی، اینتگراز φC31 وظیفهٔ پیوست ژنی میان توالی پیوست فاژی (attP) و توالی پیوست باکتریایی (attB) در سلولهای استرپتو مایسز میزبان را بر دوش دارد. [[توالی پیوست فاژی]] و [[توالی پیوست باکتریایی]] غیر همانند بوده و تنها کم وبیش ۵۰ درصد مشابهت در توالی بازی آنها گزارش شده‌است. واکنش پیوست صورت گرفته میان دو توالی attP و attB حین بکارگیری اینتگراز φC31 یکسویه بوده و از سوی دیگر فعالیت آنزیم به هیچ [[کوفاکتور]] اختصاصی میزبان وابسته نیست. یکسویه بودن واکنش فعّالیت اینتگراز φC31 نیز مایه شده تا بهره گیری از این آنزیم منجر به افزایش بازده فرآیند [[نوترکیبی]] گردد. اینتگراز φC31 به گونه کارسازی در سلولهای پستانداران عمل می‌کند. اینتگراز φC31 زمانی که بدست یک [[پروموتور]] پستاندار بازگو می‌شود، به گونه کارسازی فرآیند پیوست ژنی را میان دو جایگاه attP و attB [[وکتور]] بیرون کروموزومی موردشناسایی خود، در سلولهای انسانی انجام می‌دهد. اندازهٔ کمینهٔ دو جایگاه attP و attB مورد شناسایی این آنزیم به ترتیب ۳۴ جفت باز و ۳۹ جفت باز برآورد زده شده‌است. پژوهش در رابطه با پیوست کروموزومی در آنزیم اینتگراز φC31 بازگوکننده آن است که آنزیم توانا است فرآیند پیوست ژنی را میان توالی attB پلاسمید و attP از پیش پیوست یافته به سلولهای انسانی به گونه موثّری انجام دهد. واکنش پیوست ژنی میان توالی attP پلاسمیدی و attB از پیش پیوست یافته، بدست این آنزیم در سنجش با حالت عکس از کارآمدی پایین تری برخوردار خواهد بود.

*Michele P.Calos. “The φC31 Integrase System for Gene Therapy”. Current Gene Therapy. ۲۰۰۶2006, July. Online Article