روش‌های پروتئینی: تفاوت میان نسخه‌ها

محتوای حذف‌شده محتوای افزوده‌شده
Fatranslator (بحث | مشارکت‌ها)
جز ربات:افزودن الگو ناوباکس {{روش‌های پروتئینی}}+تمیز+
FreshmanBot (بحث | مشارکت‌ها)
جز اصلاح فاصله مجازی + اصلاح نویسه با ویرایشگر خودکار فارسی
خط ۱:
'''روش‌های پروتئینی''' تکنیک‌هایی هستند که برای مطالعه [[پروتئین]]‌ها استفاده می‌شود. روش‌های تجربی برای مطالعه پروتئین‌ها وجود دارد (به عنوان مثال برای تشخیص پروتئین‌ها، برای جداسازی و [[خالص سازی پروتئین|خالص کردن پروتئین]]‌ها و برای مشخص کردن ساختار و عملکرد پروتئین‌ها، اغلب لازم است پروتئین برای اولین بار خالص شوند).
 
روش‌های محاسباتی (Computational method) معمولاً از برنامه‌های کامپیوتری برای تجزیه و تحلیل پروتئین استفاده می‌کنند. با این وجود، بسیاری از روشهایروش‌های تجربی (به عنوان مثال، [[طیف‌سنجی جرمی]] (mass spectrometry)) نیاز به تجزیه و تحلیل محاسباتی داده‌های خام دارند.
 
== روش‌های ژنتیکی ==
تجزیه و تحلیل تجربی پروتئین‌ها به طوربه‌طور معمول نیاز به بیان و خالص سازی پروتئین‌ها دارد. بیان، با دستکاری [[DNA]] که پروتئین (های) مورد نظررا رمزگذاری می‌کند، صورت می‌گیرد. از این رو، تجزیه و تحلیل پروتئین معمولاً به روش‌های DNA، به ویژه [[کلونینگ]] نیاز دارد.
 
بعضی از این روش‌های ژنتیکی عبارتند از '''ترجمه مفهومی''' (conceptual translation)، '''موتاژنز هدفمند''' (Site-directed mutagenesis)، استفاده از یک '''پروتئین ادغامی''' (fusion protein) و تطبیق آلل با حالت‌های بیماری. برخی از پروتئین‌ها هرگز به طوربه‌طور مستقیم توالی یابی نشده‌اند، با این حال با ترجمه کدون‌ها از توالی‌های mRNA ی شناخته شده به [[اسیدهای آمینه]] با روشی که به عنوان ترجمه مفهومی شناخته شده است،شده‌است، تعیین گردیده‌اند. طی موتاسیون هدفمند، به صورت انتخابی در ساختار پروتئین تغییر ایجاد می‌شود. به دنبال آن تغییر ایجاد شده در [[فنوتیپ]] مورد بررسی قرار می‌گیرد.
 
پروتئین‌های ادغامی با متصل کردن برچسب‌های پروتئینی مانند '''His tag''' به پروتئین ساخته می‌شوند. در نتیجه امکان ردیابی پروتئین تغییر یافته، به راحتی فراهم می‌گردد.
خط ۴۴:
- طیف‌سنجی جرم/ کروماتوگرافی مایع (LC / MS): می‌تواند پروتئین‌ها را در غلظت‌های پایین (ng / mL به pg / ml) در خون و مایعات بدن تشخیص دهد.
روش‌های وابسته به آنتی بادی:
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA): به طوربه‌طور اختصاصی می‌تواند پروتئین را به pg / ml تشخیص دهد.
Protein immunoprecipitation: تکنیک رسوب کردن آنتی ژن پروتئین خارج از محلول با استفاده از آنتی بادی که به طوربه‌طور اختصاصی به آن پروتئین ویژه متصل می‌شود.
* ایمونوالکتروفورز: جداسازی و مشخص کردن پروتئین بر اساس الکتروفورز و واکنش با آنتی بادی‌ها.
* Western blot: جفت شدن الکتروفورز ژل و انکوباسیون با آنتی بادی برای شناسایی پروتئین‌های خاصی در یک نمونه از بافت هموژن شده یا عصاره بافت (یک نوع روش ایمونوالکتروفورز).